Tuumavastased antikehad (ANA)

Tuumavastased antikehad on süsteemse sidekoe haiguste kompleksse diagnostilise protsessi osa. Tuumavastaste antikehade moodustumise keeruline mehhanism muudab nende tulemuste tõlgendamise keeruliseks ning üksikute antikehade olemasolu või puudumine ei viita alati haigusprotsessile. Mis tüüpi tuumavastased antikehad on? Millal tuleks test teha?

Sisukord:

1. Tuumavastased antikehad - tüübid
2. Tuumavastased antikehad - moodustumine ja toimemehhanism
3. Tuumavastased antikehad - näidustused uuringuks
4. Tuumavastased antikehad - mis on test?
5. Tuumavastased antikehad - kuidas tulemust tõlgendada?

Tuumavastased antikehad (ANA) on rakutuuma elementide, näiteks DNA ja tsütoplasma, vastu suunatud autoantikehad. Need on üks kõige mitmekesisemaid ja enim uuritud antikehi.

Tuumavastased antikehad - tüübid

• ekstraheeritavate tuumaantigeenide vastased antikehad (anti-ENA):
• DNA topoisomeraas I vastu (anti-Scl70)
• ribonukleoproteiini (anti-RNP) vastu
• Smithi antigeeni (anti-Sm) vastu
• anti-Mi2 / Mi-2
• anti-Ro (SS-A)
• anti-La
• anti-Jo1
• anti-PM-Scl
• anti-Kn
• antikehad tuuma poore moodustava valgu gp-2010 (anti-gp-210) vastu
• antikehad loodusliku kaheahelalise DNA (anti-dsDNA) vastu
• tsentromeerilised antikehad (anti-ACA)

Tuumavastased antikehad - moodustumine ja toimemehhanism

Autoimmuunsus on immuunsüsteemi ebanormaalne reaktsioon oma kudede vastu, mille tulemuseks on autoimmuunhaiguste ilmnemine.

Kirjeldatud on erinevaid autoimmuunsuse mehhanisme, millest üks on immuunsüsteemi eest varjatud antigeenide vabanemine, näiteks põletikulise koekahjustuse tagajärjel.

Seejärel vabanevad rakutuumas leiduvad elemendid, näiteks DNA, RNA, histoonid, mida immuunsüsteem hakkab tundma võõrana ja toodab nende vastu tuumavastaseid antikehi.

Tuumavastased antikehad - näidustused uuringuks

• sidekoe haiguste kahtlus:
• süsteemne erütematoosluupus (antikehade olemasolu 95–100% patsientidest; dsDNA-vastased antikehad on spetsiifiline haigusmarker)
• ravimite põhjustatud luupus (95–100% patsientidest)
• antifosfolipiidide sündroom (40-50% patsientidest)
• süsteemne skleroderma (80–95% patsientidest, eriti anti-Scl70 antikehad)
• polümüosiit ja dermatomüosiit (40-80% patsientidest, eriti anti-Jo1 ja Mi2 vastased antikehad)
• Sjögreni sündroom (48–96% patsientidest, eriti anti-Ro ja anti-La antikehad)
• reumatoidartriit (umbes 10% patsientidest)
• juveniilne idiopaatiline artriit (vähem kui 10% patsientidest)
• Raynaud 'sündroom (20-60% patsientidest)
• fibromüalgia (15-25% patsientidest)
• segatud sidekoehaigused (95-100% patsientidest)
• haiguse aktiivsuse hindamine ja ravi efektiivsuse jälgimine, nt anti-dsDNA antikehad süsteemse erütematoosluupuse korral
• antikehade olemasolu korrelatsioon haiguse spetsiifiliste sümptomite, nt Sjögreni sündroomi ning anti-Ro ja anti-La antikehade esinemisega
• haiguse prognoosimine tulevikus

Tuumavastased antikehad - mis on test?

Tuumavastaste antikehade määramiseks kasutatakse tühja kõhuga küünarnuki painutusest võetud verd.

Antikehade määramiseks kasutatavad meetodid on väga erinevad ja sõltuvad mõõdetava tuumavastase antikeha tüübist. Need on peamiselt immunoloogilised meetodid, näiteks:

• ELISA
• RIA
• kaudne immunofluorestsents
• kahekordse immunodifusiooni meetod
• Western blot

Tuumavastaste antikehade korral kasutatakse kaheastmelist diagnoosi. Esiteks tehakse skriiningtest, kasutades kaudset immunofluorestsentsmeetodit, mida iseloomustab kõrge tundlikkus.

Kaudne immunofluorestsentsmeetod seisneb inimese epiteelirakkudest saadud HEp-2 rakkude immobiliseerimises mikroskoobi slaidil.

Selle liini rakkude tsütoplasmas ja rakutuuma antigeenid seovad patsiendi verest pärit patoloogilisi antikehi.

Pärast patsiendi seerumi lisamist klaasile seonduvad tuumavastased antikehad spetsiifiliste antigeenidega ja on tänu spetsiaalsetele fluorestsentsmarkeritele mikroskoobi all nähtavad.

Kaudse immunofluorestsentsi eeliseks on antikehade tüüpide eristamise võimalus fluorestsentsvärvi valgustuse tüübi põhjal.

Näiteks homogeenset tüüpi tuuma hõõgumine näitab anti-dsDNA või anti-ssDNA antikehade olemasolu.

Sõeluuringu positiivne tulemus tuleb alati kinnitada. Sel eesmärgil kasutatakse väga spetsiifilisi immunoloogilisi meetodeid, näiteks Western blot. Pärast tuumavastaste antikehade olemasolu tuvastamist ja tüübi kindlakstegemist määratakse selle tiiter, see tähendab seerumi suurim lahjendus, mille abil saab antikehade olemasolu tuvastada.

Tuumavastased antikehad - kuidas tulemust tõlgendada?

Tuumavastaste antikehade õige tiiter peaks olema alla 1:40.

Kui tuumavastaste antikehade skriiningtest on negatiivne ja süsteemsele sidekoehaigusele viitavaid kliinilisi sümptomeid pole, ei tohiks diagnoosi laiendada spetsiifiliste antikehade, näiteks anti-dsDNA, anti-Sm.

Kliiniliselt olulisteks tiitrideks täiskasvanutel peetakse ≥ 1: 160 ja lastel ≥ 1:40.

Positiivsete tulemuste korral tehakse ettepanek tõlgendada testi tulemusi järgmiselt:

• tiiter 1: 40-1: 80 - piiritulemus (nõrgalt positiivne), sidekoe haiguste kliiniliste sümptomite puudumisel ei ole soovitav testi korrata ega järelkontrolli teha, sest enamikul inimestel ei muutu tulemused aastate jooksul
• tiiter 1: 160-1: 640 - keskmine positiivne tulemus, sidekoe haiguste kliiniliste sümptomite puudumisel on soovitatav testi korrata 6 kuu pärast
• tiiter ≥ 1: 1280 - kõrge positiivne tulemus sidekoe haiguste kliiniliste sümptomite korral on haiguse diagnoosimiseks vajalik täiendav eridiagnoos

Tuleb meeles pidada, et tuumavastaste antikehade seroloogiline testimine on osa keerulisest diagnostilisest protsessist ning positiivset tulemust tuleb alati tõlgendada kliinilise pildi ja haiguse iseloomulike sümptomite esinemise taustal.

Madala tiitriga tuumavastaseid antikehi leidub 5% -l tervest populatsioonist ja nende sagedus suureneb vanusega.

Lisaks leitakse nende olemasolu füsioloogilistes ja patofüsioloogilistes tingimustes, kus tuumavastastel antikehadel pole diagnostilist tähtsust:

• infektsioonid, nt tuberkuloos, süüfilis, malaaria
• maksahaigus, nt maksatsirroos
• kopsuhaigused, nt sarkoidoos, asbestoos
• vähkkasvajad, näiteks leukeemia, lümfoom, rinnavähk, melanoom
• nahahaigused, nt psoriaas, samblik
• pärast elundisiirdamist, nt südame siirdamine, neeru siirdamine
• ravimite kasutamine, nt epilepsiavastased ravimid, hüdralasiin, liitiumsoolad,
• muud autoimmuunhaigused, nt Hashimoto tõbi, Addisoni tõbi, I tüüpi diabeet
• rasedus (kuni 20% rasedatest)

Tasub teada ...

Etniline variatsioon iseloomustab erinevat tüüpi tuumavastaste antikehade tekkimist.

Näiteks on süsteemse skleroosiga kaukaasia patsientidel suurem tõenäosus ACA-vastaste antikehade leidmiseks ning afroameeriklastel ja -afroameeriklastel on topoisomeraasiga reageerivad antikehad tõenäolisemalt.

Soovitatav artikkel:

ANA (tuumavastaste antikehade) diagnostiline test

Kirjandus

1. Fischer K. jt. Autoantikehad reumatoloogilises praktikas. Foorum Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Sisehaigused, toimetanud Szczeklik A., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Laboridiagnostika kliinilise biokeemia elementidega. Käsiraamat meditsiinitudengitele, toimetanud Dembińska-Kieć A. ja Naskalski J.W., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3. väljaanne

Autori kohta

Karolina Karabin, MD, PhD, molekulaarbioloog, laboridiagnost, Cambridge Diagnostics Polska Mikrobioloogia erialale spetsialiseerunud bioloog ja laboridiagnost, kellel on üle 10-aastane laboritöö kogemus. Molekulaarmeditsiini kooli lõpetanud ja Poola inimgeneetika seltsi liige, Varssavi Meditsiiniülikooli hematoloogia, onkoloogia ja sisehaiguste osakonna molekulaardiagnostika laboratooriumi uurimistoetuste juht. Ta kaitses Varssavi Meditsiiniülikooli 1. arstiteaduskonnas arstiteaduse doktori nimetust meditsiinibioloogia alal. Paljude teadus- ja populaarteaduste autor on laboridiagnostika, molekulaarbioloogia ja toitumise valdkonnas. Igapäevaselt juhib ta laboridiagnostika valdkonna spetsialistina Cambridge Diagnostics Polska sisulist osakonda ja teeb koostööd CD-dieedikliiniku dietoloogide meeskonnaga. Ta jagab oma praktilisi teadmisi haiguste diagnostika ja dieetravi kohta spetsialistidele konverentsidel, koolitustel ning ajakirjades ja veebisaitidel. Teda huvitab eriti tänapäevase elustiili mõju keha molekulaarsetele protsessidele.

Loe veel selle autori artikleid