Puukborrelioosi testid - kuidas need välja näevad ja kui palju puukborrelioosi testid maksavad

Puukborrelioosi testid tuleks teha iga kord, kui puugihammustus on tekkinud. Diagnoosi alustamist peate ootama kuni mitu nädalat. Enne seda saate proovida meid hammustanud puuki, et näha, kas see on mõne haiguse kandja. Milline on puukborrelioosi testimine ja mis on testide hind?

Puukborrelioosi (Borrelia burgdorferi ja selle sortide põhjustatud puukbakteriaalne haigus) testimine on soovitatav teha võimalikult varakult pärast puugihammustust.

Borrelioosi borrelioosi diagnoosimisel kasutatakse spetsiifilisi diagnostilisi skeeme, mis põhinevad peamiselt seroloogilistel meetoditel.

Võttes arvesse haiguse keerukat patomehhanismi ja laboratoorsete meetodite piiranguid, võib puukborrelioos põhjustada palju diagnostilisi raskusi.

Seetõttu on turul üha rohkem laborikatseid, mis selle probleemi lahendaksid. Kahjuks pole enamikul neist kinnitatud diagnostilist väärtust ja neid ei tohiks puukborrelioosi rutiinses diagnoosimisel kasutada.

Sisukord:

1. Varajane kohalik borrelioos - laborikatsed
2. Varakult levitatud puukborrelioos - test puukborrelioosi kohta
3. Hiline puukborrelioos - millised testid puukborrelioosi avastamiseks?
4. Borrelioosi borrelioos - ravi jälgimine
5. Borrelioos - ringlevad immuunkompleksid
6. Puukborrelioos - lümfotsüütide transformatsiooni test (LTT)
7. Borrelioos - CD57 test
8. Berlioz - ELFA ja CLIA test
9. Puukborrelioos - nahalt eemaldatud puugi uurimine

Varajane kohalik borrelioos - laborikatsed

Selles etapis pärast nakatunud puugiga kokkupuudet tekib lokaalne nakkus ja nn migrantide erüteem (ladina erüteem migrans), mis on puukborrelioosile iseloomulik sümptom.

Borrelia nakkuse tuvastamiseks piisab erüteemi olemasolust puugihammustuskohas. Varajane kohalik puukborrelioosi staadium kestab mõnest päevast kuni umbes 4 nädalani ja patsiendil võivad tekkida gripilaadsed sümptomid.

See on nakkuse varaseim staadium, kus seroloogilised meetodid (ELISA ja Western blot), IgM ja IgG antikehade olemasolu testimine, võivad anda valenegatiivseid tulemusi. Selles etapis on nn seroloogiline aken, mis on nakatumise esialgne periood, kui keha ei tooda veel Borrelia vastaseid antikehi.

Esimesed IgM antikehad ilmnevad umbes haiguse 2. nädalal, kuid enamikul inimestel tuvastatakse nende olemasolu alles mitme nädala jooksul. Negatiivse seroloogilise tulemuse korral tuleb testi korrata umbes 3-4 nädalat pärast nakatumist.

ELISA ja Western blot kompenseerib Riiklik Tervisefond, kuid suunaval arstil peab olema alust neid tellida. Eraviisiliselt maksab ELISA test 30–100 PLN ja Western blot 80–200 PLN.

Molekulaarset PCR-testi võib kaaluda nakatumise väga varajases staadiumis. Meetod tuvastab bakteriaalse geneetilise materjali (DNA), mida on kehavedelikes kõige rohkem nakkuse varajases staadiumis. Mida pikem on aeg nakatumisest, seda väiksem on tõenäosus bakterite DNA tuvastamiseks.

Siiski tuleb meeles pidada, et Poolas pole puukborrelioosi diagnoosimisel endiselt molekulaarsete meetodite standardiseerimist ja seetõttu ei soovitata seda meetodit diagnostikavahendina kasutada. Molekulaarseid uuringuid riiklik tervisekassa ei hüvita ja kulud jäävad vahemikku 160–200 Poola zlotti.

Tasub teada

Borrelia burgdorferi nakkuse etapid:

• varajane kohalik puukborrelioos
• varakult levitatud puukborrelioos
• hiline borrelioos

Loe ka: erüteem pärast puugihammustust. Kuidas seda ära tunda? Puukentsefaliidi vaktsiin

Varakult levitatud puukborrelioos - puukborrelioosi test

Varakult levinud puukborrelioosi staadiumis on nakatunud paljud elundid, liigesed, lihased, närvisüsteem ja vereringesüsteem. Varajane puukborrelioos areneb koos peavalude, näonärvi põletiku, väsimuse või kaela jäikusega. See faas kestab umbes paar nädalat pärast nakatumist.

Varakult levinud borrelioosi staadiumis esinevad peamiselt IgM antikehad. 6-8 nädalat pärast nakatumist hakkavad ilmnema ka IgG antikehad. Seetõttu on seroloogilised meetodid nakkuse selles staadiumis diagnostika aluseks.

Borrelioosi borrelioosi seroloogiline diagnoosimine algab sõeluuringuga, see tähendab tundliku ELISA testi sooritamisega.

Kui tulemus on negatiivne, tähendab see, et Borrelia spiroheesid ei ole avastatud või tulemus on valenegatiivne. Kui tulemus on positiivne või nõrgalt positiivne, tuleks ELISA meetodi tulemuste kinnitamiseks teha kinnitav Western blot test, mis on väga spetsiifiline.

Neuroborrelioosi kahtluse korral saab teha tserebrospinaalvedelikust molekulaarse PCR-testi. PCR-meetod on väga tundlik ja arvestades, et Borrelia spiroheetide arv tserebrospinaalvedelikus on väike, võib sellest abi olla diagnoosi seadmisel.

Ilma eelnevate seroloogiliste testideta ei kujuta see endast siiski infektsioonidiagnoosi.

Hiline puukborrelioos - millised testid puukborrelioosi avastamiseks?

Nakatumise viimane etapp on hiline puukborrelioos, mille käigus bakterid levivad veelgi elunditesse ja tekivad üha tõsisemad nakkuse tüsistused. Ilmuvad hiline puukborrelioos, liigese puukborrelioos või atroofiline dermatiit. Hiline puukborrelioos võib kesta kuni mitu aastat.

Nakkuse selles etapis tuvastatakse seroloogiliste meetoditega ainult IgG antikehad. Borrelia spiroheetide vastane IgG kõrge sisaldus ja sümptomite olemasolu viitavad puukborrelioosile. Mõnel juhul (eriti inimestel, kes nakatumise varases staadiumis said antibiootikumravi väga kiiresti) võivad IgM antikehad püsida mitu aastat. Sellistes olukordades ei viita need antikehad aktiivsele nakkusele.

Mis on puukborrelioos?

Borrelioosi borrelioos - ravi jälgimine

Borrelioosi diagnoosimisel on üks suurimaid raskusi tundlike ja spetsiifiliste laborimarkerite puudumine, mis saaksid hinnata antibiootikumravi efektiivsust. Vaikimisi kasutatakse haiguse sümptomite jälgimist selle tõhususe hindamiseks.

Uuringud näitavad, et Borrelia nakkuse efektiivsuse jälgimiseks võib kasutada spiroheedi VLsE / C6 antigeeni vastaste IgM ja IgG antikehade taseme määramist.

Spiraalvalk VlsE / C6 põhjustab immuunsüsteemi väga tugevat ja kiiret reageerimist. Selle antigeeni lisamine seroloogiliste testide komplekti suurendab oluliselt testi tundlikkust. IgM antikehade olemasolu VLsE / C6 valgu vastu borrelioosiga patsientidel on:

• Nakkuse varajases staadiumis patsientidel 20-50%
  
  
• Varakult levinud borrelioosiga patsientidel 70–90%
  
  
• hilise borrelioosiga patsientidel peaaegu 100%

Riiklik tervisekassa ei hüvita uuringut ja see maksab vahemikus 80–150 Poola zlotti.

Borrelioos - ringlevad immuunkompleksid

Borrelioosi diagnoosimise aluseks on seroloogilised testid. Siiski on kliinilisi olukordi, mis võivad põhjustada nende testide valenegatiivse tulemuse. Üks neist on nn immuunkompleksid, mis koosnevad Borrelia spiroheetide antigeenidest ja spetsiifilistest IgM või IgG antikehadest.

Immuunkompleksid blokeerivad antikehad, muutes need seroloogiliste meetodite abil võimatuks ja võivad seetõttu põhjustada valenegatiivseid tulemusi. See probleem ilmneb peamiselt väga intensiivsete infektsioonide korral.

Kui patsiendil on puukborrelioosi ilmsed sümptomid ja testitulemused on negatiivsed, pakuvad mõned laborid testi, mis hõlmab immuunkomplekside keemilist lagundamist. Selle ravi eesmärk on antikehade vabanemine ja alles seejärel nende kontsentratsiooni mõõtmine.

Uuringud näitavad, et sellise protseduuri kasutamine enne seroloogilisi teste võib märkimisväärselt suurendada Borrelia antigeenide antikehade avastamist. Seda meetodit ei kasutata aga tavapäraselt, kuna laborites puudub standardimine.

Testi hind varieerub vahemikus 110-210 PLN (IgM või IgG antikeha puhul) ja Riiklik Tervisekassa seda ei hüvita.

Puukborrelioos - lümfotsüütide transformatsiooni test (LTT)

Lümfotsüütide transformatsiooni testi (LTT) kasutatakse erinevates meditsiinivaldkondades, sealhulgas transplantoloogias, allergoloogias ja kaudselt ka Borrelia spiroheetide diagnoosimisel. Borrelioosi diagnoosimisel tuvastatakse testiga immuunrakkude (T-lümfotsüüdid) olemasolu patsiendi veres, mis on bakteritega kokku puutunud. Test kasutab ELISPOT tehnikat, mille põhimõte sarnaneb ELISA meetodiga, kuid on sellest tundlikum.

Mõned inimesed näitavad, et Borrelia spiroheetide LTT testimine tuleks läbi viia:

• aktiivse nakkuse kinnitamine positiivsete seroloogiliste testide tulemustega inimestel, kuid ilma haigusele selgelt viitavate sümptomiteta
  
  
• aktiivse nakkuse kinnitamine negatiivsete või piiripealsete seroloogiliste testidega, kuid haiguse kliiniliste sümptomitega isikutel
  
  
• infektsiooni jälgimine pärast antibiootikumravi
  
  
• puukborrelioosi kordumise hindamine

2014. aastal avaldatud töörühma soovituste kohaselt ei ole puukborrelioosi diagnoosimisel soovitatav kasutada nii LTT testi kui ka antikehade taseme määramist vereringes olevates immuunkompleksides.

Need meetodid peavad siiski olema valideeritud (st kinnitama nende usaldusväärsust), et olla kasulik diagnostiline tööriist.

Testi hind varieerub vahemikus 400–550 Poola zlotti ja Riiklik Tervisefond seda ei hüvita.

Borrelioos - CD57 test

CD57 pinnamarker on valk, mis esineb immuunsüsteemi rakkude pinnal - looduslikud tapjad (NK-rakud).

ILADS-i rühma ehk Rahvusvahelise Borrelioosi ja sellega seotud haiguste ühingu arstid usuvad, et puukborrelioosi kroonilises faasis on immuunsus pärsitud, mis kajastub CD57 markeriga NK-rakkude populatsiooni vähenemises.

Nad oletavad, et nende aktiivsuse hindamiseks saab kasutada nende arvu veres. Kuid nagu LTT meetodi ja immuunkomplekside häirimise korral, vajab see meetod endiselt valideerimist. Testi hind varieerub 170 Poola zloti vahel ja Riiklik Tervisefond seda ei hüvita.

Lisateavet CD57 testi kohta leiate siit.

Berlioz - ELFA ja CLIA test

Borrelioosi diagnoosimisel kasutatakse peamiselt ELISA meetodit (ensüümidega seotud immunosorbenttest). Kuid paljud laborid kasutavad ka muid seroloogilisi meetodeid, näiteks ELFA (ensüümidega seotud fluorestsentsanalüüs), mida teostatakse Vidas®-iga, ja CLIA (Chemiluminescent Immunoassay), mis viiakse läbi Liaison® analüsaatoriga.

Kuidas nad erinevad? Kolme meetodi toimimispõhimõte on väga sarnane ning selles kasutatakse spetsiifilisi antikehi ja nende võimet seonduda antigeenidega. ELFA ja CLIA meetodid võimaldavad analüüse automatiseerida ja katseid laboris kiiremini läbi viia. Need meetodid võimaldavad testitud bioloogilises materjalis tuvastada ka antikehade madalamaid kontsentratsioone.

Mis puutub kolme meetodiga saadud tulemuste usaldusväärsusse, siis need on peaaegu ühesugused. ELFA ja CLIA meetoditega saadud positiivsed või nõrgad positiivsed tulemused, nagu ka ELISA meetodil, tuleks kinnitada Western blot analüüsiga.

Tasub teada

Puukborrelioos - nahalt eemaldatud puugi uurimine

Mõnes laboris pakutakse nahalt eemaldatud puugi testimist Borrelia DNA olemasolu suhtes. Töörühma 2014. aastal avaldatud soovituste kohaselt ei ole selline uuring absoluutselt puukborrelioosi diagnostiline meetod.

Ehkki puukidest bakterite leviku oht inimesele on proportsionaalne vere imemise ajaga, ei tähenda spiroheedi DNA olemasolu puugis nakkuse sünonüümi ja selle puudumine ei välista nakatumist.

Meetodi pooldajad usuvad, et sellest on abi antibiootikumravi alustamisel inimestel, kellel on borrelioosile viitavad sümptomid, kuid ilma rändava erüteemita. Selliste vastajate hind varieerub vahemikus 100–500 Poola zlotti ja Riiklik Tervisefond seda ei hüvita.

Kirjandus

1. Puukide kaudu levivate haiguste laboridiagnostika. Töörühma soovitused: Riiklik laboridiagnostikute koda, Riiklik rahvatervise instituut-riiklik hügieeniinstituut, nakkushaiguste valdkonna riiklik konsultant, nakkushaiguste ja neuroinfektsioonide osakond, Białystoki Meditsiiniülikool, Poola Viroloogia Selts, Varssavi 2014.
2. Rychlik U. jt. Lümfotsüütide transformatsiooni testi (LTT) laboridiagnostika. Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425–428.
3. Marques A. R. puukborrelioosi laboratoorsed diagnoosid - edusammud ja väljakutsed. Infect Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295–307.
4. Marques A. jt. Looduslike tapjarakkude arv ei erine Lyme'i tõve järgse sündroomiga ja kontrollrühma patsientidel. Clin vaktsiini immunol. 2009; 16: 1249-1250.
5. Krzemień P. J. Vlse / C6 antigeeni tähtsus markerina varase puukborrelioosi diagnoosimisel ja selle ravi efektiivsuse uurimisel. Tsivilisatsiooni terviseprobleemid 2017; 11 (2): 87-92.
6. Miąskiewicz K. jt. Uue metodoloogilise lähenemisviisi pakkumine ja Borrelia burgdorferi vastaste antikehade tulemuste tõlgendamine - ringlevate immuunkomplekside antikehade koostise analüüs. Reumatoloogia 2011; 49, 5: 328–334.
7. Muraczyńska B. ja Gałęziowska E. Puukborrelioosi diagnoosimise ja raviga seotud vaidlused maailmas. Üldmeditsiin ja terviseteadused, 2015; 21 (4): 372–377.

Autori kohta

Karolina Karabin, MD, PhD, molekulaarbioloog, laboridiagnost, Cambridge Diagnostics Polska Mikrobioloogia erialale spetsialiseerunud bioloog ja laboridiagnost, kellel on üle 10-aastane laboritöö kogemus. Molekulaarmeditsiini kooli lõpetanud ja Poola inimgeneetika seltsi liige, Varssavi Meditsiiniülikooli hematoloogia, onkoloogia ja sisehaiguste osakonna molekulaardiagnostika laboratooriumi uurimistoetuste juht. Ta kaitses Varssavi Meditsiiniülikooli 1. arstiteaduskonnas arstiteaduse doktori nimetust meditsiinibioloogia alal. Paljude teadus- ja populaarteaduste autor on laboridiagnostika, molekulaarbioloogia ja toitumise valdkonnas. Igapäevaselt juhib ta laboridiagnostika valdkonna spetsialistina Cambridge Diagnostics Polska sisulist osakonda ja teeb koostööd CD-dieedikliiniku dietoloogide meeskonnaga. Ta jagab oma praktilisi teadmisi haiguste diagnostika ja dieetravi kohta spetsialistidele konverentsidel, koolitustel ning ajakirjades ja veebisaitidel. Teda huvitab eriti tänapäevase elustiili mõju keha molekulaarsetele protsessidele.